高壓滅菌是利用高壓和高熱釋放的潛熱進行滅菌。在密閉的容器中，水的沸點因為蒸汽壓力增大而升高，從而提高蒸汽的溫度，用來進行有效滅菌。由于微生物細胞蛋白質在濕熱情況下更容易凝固，因此在相同的溫度下，濕熱的殺菌效果比干熱殺菌更好，同時濕熱的穿透力也更強。
 

　　二、高壓滅菌器的分類

　　高壓滅菌器主要分為兩大類：下排式壓力蒸汽滅菌器和預真空壓力蒸汽滅菌器。

　　- 下排式壓力蒸汽滅菌器：包括手提式和臥式兩種。通過熱蒸汽壓迫使冷空氣從底部排氣孔排出，當壓力達到103 kPa至137 kPa時，溫度可達121.3℃至126.2℃，通常15至30分鐘即可達到滅菌目的。

　　- 預真空壓力蒸汽滅菌器：配有空氣抽真空泵，在通入蒸汽前先將內部抽成真空，形成負壓，使蒸汽更容易穿透。在壓力206 kPa、溫度達132℃時，4至5分鐘即可完成滅菌。
 

　　三、高壓滅菌器的使用方法

　　1、手提式高壓蒸汽滅菌器

　　- 使用方法：在鍋內加入適量的水，將滅菌物品放入滅菌器內，蓋好鍋蓋并擰緊螺絲。打開排氣閥，加熱至沸騰后維持10至15分鐘排盡冷空氣，然后關閉排氣閥，使壓力升至103 kPa，溫度達到121.3℃，維持30分鐘。停止加熱，待壓力表降至“0”且溫度降至100℃以下后，打開排氣閥，慢慢開蓋。

　　- 注意事項：切勿在壓力和溫度較高時打開排氣閥，以免引起培養基劇烈沸騰沖出管口或瓶口，污染培養基。

　　2、臥式高壓蒸汽滅菌器

　　- 使用方法：關閉排水閥，調整總閥至“全排”，打開進水閥，待水距水表頂端5mm至10mm處，關閉進水閥。裝入物品后，當夾層壓力表達到滅菌需要的壓力時，將套層中的蒸汽導入消毒室進行滅菌。消毒完畢后，根據物品類型選擇合適的排氣方式。

　　- 注意事項：對操作人員要求高，需經過專業培訓。

　　3、全自動高壓蒸汽滅菌器

　　- 使用方法：接通電源，注入加熱用水，放入滅菌物品。關閉蓋子后，在控制板上選擇所需的滅菌程序，設定滅菌的溫度和時間，按下“開始”鍵。滅菌完畢后，滅菌器內的溫度降至設定溫度，控制桿鎖自動打開。

　　- 注意事項：防止多次使用加熱用水，以免腐蝕滅菌器箱壁和管道堵塞。
 

　　四、高壓滅菌應注意的問題

　　- 滅菌包不宜過大過緊，滅菌器內物品的放置總量不應超過滅菌器柜室容積的85%。

　　- 盛裝物品的貯槽或盒應有通氣孔，若無孔，應將容器蓋打開。

　　- 布類物品應放在金屬、搪瓷類物品之上，避免蒸汽遇冷凝成水珠，影響滅菌效果。

　　- 注意安全操作，每次滅菌前檢查滅菌器是否處于良好工作狀態。

　　- 滅菌完畢后減壓不要過猛，壓力表回歸“0”位后才可打開蓋或門。
 

　　五、高壓滅菌效果的測定

　　1、化學指示劑法

　　利用化學指示劑在一定溫度與作用時間下受熱變色或變形的特性來判斷是否達到需要的滅菌參數。例如，3M壓力滅菌指示膠帶在121℃持續20分鐘或130℃持續4分鐘后，膠帶上的白色指示線條會全部變黑。

　　2、留點溫度計法

　　利用水銀溫度計不回流的特性，可以指示滅菌器在滅菌過程中達到的最高溫度。此法只能驗證溫度，不能指示滅菌時間是否達到要求。

　　3、自制測溫管法

　　利用一些化學藥品受熱熔化后再冷卻，晶體的外形不同的特性來判斷溫度是否達標。例如，苯甲酸的熔點為121-123℃，與滅菌器的滅菌溫度基本吻合。

　　4、生物指示劑法

　　利用非致病性的嗜熱脂肪桿菌的芽孢作為指示菌，來測定熱力滅菌的效果。滅菌后取指示劑接種到培養基中，若培養基澄清、顏色沒有變化即說明芽孢被殺死，滅菌效果良好。